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定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒CHRNA2(neuronal) 煙型酰膽受體A2(神經(jīng)型)100 ulAT豐富結合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒*/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1100 ulApelin ELISA試劑盒Nox3/NADPH oxidase 3 有絲分裂氧化酶2100 ulApelin 36(AP36)ELISA試劑盒N
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū) |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7839 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
二(農殘級,≥99.9%,,含50-150ppm戊穩定劑)DLL1 AntibodyN-亞硝基新煙草
1,二氧六環(huán)(農殘級)DLL1 Antibody基四氫吡喃
化銫(用于高通量質(zhì)譜,99.9995%)DLL4 Antibody氟吡啶
(for HPLC, ≥99.5%)DLL4 Antibody(R)-(+)--1-基-1-
1,二甲基-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC))SirT6 AntibodyN-甲基對
二甲基亞砜(農殘級)Myoglobin (D2F5X) Rabbit mAb對基
鄰二甲酸二甲酯(色譜固定液)Acetyl-Histone H4 (Lys12) Antibody氧基酸酯
十二烷基*基化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級)Histone H4 Antibody2,5-二
正庚烷(農殘級,≥99%(GC))Evi-1 (C50E12) Rabbit mAb馬布臺諾
(農殘級,≥99.8%)SimpleChIP® Human ZNF335 Promor Primers1-基-1,2-二酮
異辛烷(農殘級,>99.5%(GC))Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody1,5-二甲基-1H-吡唑-
(色譜固定液,30℃)Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody2,2'-二吡啶甲基
甲(for HPLC,≥99.9%)Histone H2A.X AntibodyDL-羥基丁酸鈉
甲(農殘級, ≥99.9%)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)間甲
甲(LC-MS,≥99.9%)Naked2 (C36D3) Rabbit mAb2-甲氧基
二十酸甲酯(分析標準品,≥99.0% (GC))NUP98 (C37G10) Rabbit mAb-6-三氟甲基噠
甲基異丁酮(for HPLC,≥99.5%)NUP98 (C39A3) Rabbit mAb(R)-2-甲基-CBS-惡唑烷
異(農殘級,99.9%)NUP98 (C39A3) Rabbit mAb2,3,4,5,6-五氟甲酸
A組鏈球菌菌壁多糖(ASP)ELISA試劑盒CHRNA4 煙型酰膽受體α4100 ul
A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒CHRNA7 煙型酰膽受體α7100 ul
A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒CHRNA2(neuronal) 煙型酰膽受體A2(神經(jīng)型)100 ul
AT豐富結合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1100 ul
Apelin ELISA試劑盒Nox3/NADPH oxidase 3 有絲分裂氧化酶2100 ul
Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒NOX4/NADPH oxidase 4 NADPH氧化酶NOX家族的成員420 ul
apelin 13(AP13)ELISA試劑盒Nanog 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白100 ul
apelin 12(AP12)ELISA試劑盒NAIF1 proin 核凋亡誘導因子蛋白1100 ul
AP-5復合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒Natrexone 抗納曲酮IgG100 ul
小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)BEND3蛋白抗體7,4'-Di-O-methylapigenin 5-O-xylosylglucoside中文名:別名:分子式:C28H32O14
BEND4蛋白抗體Lethedioside A中文名:別名:分子式:C29H34O15
BEND6蛋白抗體3-Deoxysappane B中文名:別名:分子式:C16H14O5
立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因)7-O-Methyleriodictyol中文名:7-O-甲基圣草酚別名:Sternbin分子式:C16H14O6
染色體相關(guān)蛋白H抗體Isosativan中文名:別名:7-O-Methylvestitol分子式:C17H18O4
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。