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超家族成員10抗體Kanshone H中文名:別名:分子式:C15H20O大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體6α-Hydroxytomentosin中文名:別名:分子式:C15H20O4IQCD蛋白抗體Citroside A中文名:柑橘苷
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 細小病毒BPCR檢測試劑盒規格 |
規格 | 50T |
貨號 | LZP7832 |
實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
2-(三氟甲基)吡啶-甲酸(97%)Ambra1 Antibody6-氟煙酸
3,5-二甲酰(98%)eIF4A1 Antibody氟-2-
3,5-二甲酰(99%,用于HPLC衍生標記)eIF4A1 Antibody四氫-2H-吡喃-
N-甲基-N-(*基硅基)酰(97%)Phospho-IRS-1 (Ser302) (34C7) Rabbit mAb2-氨基-并噻唑
苔黑酚一水合物(98%)MAVS (D5A9E) Rabbit mAb順-1,二-2-
N,O-雙(*基硅烷基)酰(95%)SirT1 (D739) Antibody二羰基環(huán)戊二鈷
四基(AR)MALT1 Antibody鄰二酰
1-(三氟酰)咪唑(用于GC衍生化,≥98.5%)NF-κB1 p105/p50 (D4P4D) Rabbit mAb (PE Conjuga)1,9-二溴壬烷
二硫化碳(低級,≥99.9%)NCBP1/CBP80 (D7Z2Z) Rabbit mAb叔丁基酸-2,二甲基丁二酯
二硫化碳(ACS,≥99.9%)SirT1 (C14H4) Rabbit mAb1-Boc-甲氨基哌啶
2,二溴酰(98%)SirT1 (C14H4) Rabbit mAb5,10,15,20-四(吡啶基)卟啉
二環(huán)己(DCHA)(用于滴定法測定異酸酯,≥99.5%(GC))LRRC8A/SWELL1 Antibody5--2-酰噻吩
煤油(試劑級)FoxO3a (75D8) Rabbit mAb2-噻吩-5-甲酸
石油(AR,bp 60-90 °C)eIF4G Antibody炔
石油(AR,bp 30-60 °C)FoxO4 (55D4) Rabbit mAbN,N-二甲基酰
石油(AR,bp 90-120 °C)Phospho-SF3B1 (Thr313) (D8D8V) Rabbit mAbN-甲酰
1,1,2-三三氟烷(CFC-113)(99.5%)VE-Cadherin (D87F2) XP® Rabbit mAb2-(二甲氨基)-2-甲基-1-
滑石粉(800目)VE-Cadherin (D87F2) XP® Rabbit mAb2,6-二溴
Dicer-1 ELISA試劑盒MIP-1 Beta 巨噬細胞炎癥因子1β 100 ul
DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒MIP4/CCL18 巨噬細胞炎癥蛋白18100 ul
C型凝集素結構域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒MITF 小眼相關(guān)轉錄因子100 ul
C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1100 ul
C多肽(CP)ELISA試劑盒MMP-1 基質(zhì)金屬蛋白酶-1100 ul
CXC趨化因子受體7(CXCR7)ELISA試劑盒MMP-2 基質(zhì)金屬蛋白酶-2100 ul
CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒MMP-3 基質(zhì)金屬蛋白酶-3100 ul
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7100 ul
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒MMP-8 基質(zhì)金屬蛋白酶-820 ul
細小病毒BPCR檢測試劑盒規格免疫球蛋白超家族成員6抗體Kanshone A中文名:別名:分子式:C15H22O2
免疫球蛋白超家族成員9抗體Isonardoperoxide中文名:別名:分子式:C15H22O4
免疫球蛋白超家族成員10抗體Kanshone H中文名:別名:分子式:C15H20O
大腦和特異性免疫球蛋白超家族成員11抗體6α-Hydroxytomentosin中文名:別名:分子式:C15H20O4
IQCD蛋白抗體Citroside A中文名:柑橘苷A別名:分子式:C19H30O8