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雞白痢沙門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:ECHO IgM檢測試劑盒若不能及時(shí)檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個(gè)月內檢測),或-80℃(6個(gè)月內檢測),避免反復凍融
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 雞白痢沙門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Salmonella pullorumPCR |
貨號 | LZP7265 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
Ceathic acid四氫噻吩-3-酮 98%托品酮 99%
Cedrelone四氫噻吩-3-酮 ≥98%, Kosher, FG托品酸 98%
Celastrol乙基麥芽酚 99%α-托品 98%
Charantadiol A2-乙酰呋喃 99%溴代十二烷 98%
Chiisaside1,6-己二硫 97%溴氯 98%
Chikusetsusaponin V methyl ester巰基乙酸甲酯 96%氯代環(huán)己烷 99%
Chikusetsusaponin IVa甲硫 99%4-甲氧基苯基溴化鎂 1M THF溶液
Chikusetsusaponin IV甲硫 Standard for GC,>99.7%(GC)O-6-芐基鳥(niǎo)嘌呤 98%
Cimicifugoside甲硫 ≥99%, FCC, FG環(huán)基溴 99%
Cimigeside3-甲硫基 98%環(huán)基溴 98%
Cimiracemoside C3-甲硫基 ≥97%, FG(溴甲基)環(huán)烷 97%
Cimiracemoside D2,3-戊二酮 98%3-溴化鎂 0.5 M THF溶液
Cimiside B噻吩-2-硫 97%仲丁基氯化鎂 2.0M 四溶液
Ciwujiaside B2,3,5-*基吡 99%芐基溴化鎂 1mol/L THF溶液
Ciwujiaside E對氨基苯甲 98%環(huán)丁 97%
Clidiside A1-甲基哌啶基-2-甲 97%環(huán)丁 96%
2-氯乙基膦酸(>90%,植物激素級)DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Phospho-PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
硝酸鐵九DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjugate)Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
松三糖DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjugate)Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體
聚乙二20000Atg2A AntibodyPhospho-PLC beta3 (Ser537) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體
對甲苯磺酸鈉Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAbPhospho-PLC beta3 (Ser1105) 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體
高酸鈉一(>97%,BR)Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAbphospho-PLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 磷酸化心臟磷蛋白抗體
SPDP;N-琥珀酰亞胺-3-(2-吡啶二硫代)酸酯Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAbphospho-PLB(Ser16) 磷酸化心臟磷蛋白抗體
2-氨基噻唑(>98%,BR)Animal-Free Blocking Solution (5X)Phospho-PKR (Thr451) 磷酸化蛋白激酶R抗體
氯化鈰七Animal-Free Blocking Solution (5X)Phospho-PKR (Thr446/451) 磷酸化蛋白激酶R抗體
D-阿拉伯糖(標準品)DAPTPhospho-PKR (Thr446) 磷酸化蛋白激酶R抗體
雞白痢沙門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒價(jià)格小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100毫克
小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500張/盒
小鼠β萘(β-Nph)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光25克
小鼠β內啡肽(β-EP)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:25毫克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。