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有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:tPSA檢測試劑盒。每個(gè)標本量收集體積=100ul×檢測種類(lèi)。取材前須向銷(xiāo)售人員索要說(shuō)明書(shū)。
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格 |
英文名稱(chēng) | Raillietina cesticillusPCR |
貨號 | LZP7213 |
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
Cadmium四氯化銥(IV) 合物 Ir 48.0 - 55.0 %二甲基三硫 98%
Cadmium bromide氯亞鉑酸 AR魚(yú)腥草 98%
Cadmium carbonate醋酸鈀 AR,Pd 46.0 - 48.0 %2.5-二羥基-1.4-二噻烷 97%
Cadmium hydroxide氧化鈀 Pd ≥85% 2,3-二乙基-5-甲基吡 98%
Cadmium iodide二溴化鈀 Pd 40 % 四氫噻吩-3-酮 98%
Cadmium sulfide氯鈀酸 Pd 26.2%四氫噻吩-3-酮 ≥98%, Kosher, FG
Cadmium acetate dihydrate氯化鈀 Pd 59-60%反式-2,4-癸二烯 >90.0%(GC)
N-Acetylphenylhydrazine氯鉑酸 98%2,5-二甲基呋喃 99%
Hydrazine dihydrochloride硝酸鈀 Pd 18.09 wt. % in nitric acid香草酸乙酯 97%
Hydrazine mohydrochloride硝酸鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%4-乙基辛酸 98%
3-Hydroxy-2-naphthoic hydrazide氫氧化鈀 AR,99.99%2-乙烷基-3,5-二甲基吡 99%
Phenylhydrazine氫氧化鈀 20% Pd糠基硫 98%
Antimony氫氧化鈀 10% Pd糠基硫 97%
Antimony鈀粉 AR,99.5%乙酸糠硫酯 99%
Antimony(III)oxide鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm3-(2-呋喃基)烯 99%
Antimony(III)chloride氧化鉑化物 AR,99.95% 甲基糠基二硫 98%
去甲斑蝥素(標準品)Galectin-1/LGALS1 (D608T) Rabbit mAb (IHC Formulated)Proteasome 20S alpha 5 蛋白酶體PSMα5抗體
反式玉米素PLD2 (E1Y9L) Rabbit mAb (IHC Specific)Proteasome 20S alpha 3(Ser250) 磷酸化蛋白酶體PSMα3抗體
氯亞鉑酸 eIF5 (D5G9) Rabbit mAbProteasome 20S alpha 3 蛋白酶體PSMα3抗體
環(huán)黃芪Vinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAbProteasome 20S alpha 2 蛋白酶體PSMα2抗體
馬兜鈴酸AVinculin (E1E9V) XP® Rabbit mAbProteasome 20S alpha 1+2+3+5+6+7 蛋白酶體PSMα1+2+3+5+6+7抗體
羥基茜草素/紅紫素(標準品)SimpleChIP® Mouse PER1 Intron 1 PrimersProteasome 20S alpha + beta 蛋白酶體PSMα+β抗體
酸棗仁皂苷D(標準品)PLD2 (E1Y9G) Rabbit mAbProteasome 19S S7 蛋白酶體PRS7抗體
偽原薯蕷皂苷PathScan® Total BACE Sandwich ELISA KitProteasome 19S S5A 26S蛋白酶調節亞型S5a抗體
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標準品)Phospho-TRAF2 (Ser11) (E2B6L) Rabbit mAbProteasome 19S S3 蛋白酶體PSMD3抗體
3-異倒捻子素PathScan® Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244) Sandwich ELISA KitProteasome 19S 10B 蛋白酶體PRS10B抗體
有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR檢測試劑盒價(jià)格人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:10塊/包
人誘導型一氧化氮合成酶(iS)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃1克
人魚(yú)精蛋白1(PRM1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃25毫克
人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人孕激素/孕(PROG)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT100克
人孕和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:RT10克
人孕受體(PGR)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:5克
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。