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偽牛痘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格

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偽牛痘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
HPV-IgM檢測試劑盒 將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預冷PBS 進(jìn)行充分研磨

更新時(shí)間:2021-03-13
訪(fǎng)問(wèn)次數:472

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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產(chǎn)品名稱(chēng)

 偽牛痘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格

 英文名稱(chēng)

 Pseudocowpox Virus(PCPV)PCR

 貨號

 LZP7197

實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
Potassium hydrogen phthalate苯肼 AR,98.0%燒堿石棉 CP,20-30目

Potassium bromide苯肼 CP,96.0%氫鈉 AR()

Potassium carbonate鎢酸鈉 AR,99.5%亞硝酸鈷鈉 99.995% metals basis

Potassium carbonate sesquihydrate鎢酸鈉 CP,99.0%燒堿石棉 CP, 10-20目

Potassium chromate鎢酸鈉 99.995% metals basis鄰聯(lián)甲苯胺 AR,98%

Potassium dichromate鎢酸鈉 ACS, 99.0-101.0%鄰聯(lián)甲苯胺 CP,97%

Potassium hydroxide鎢酸 99%鄰聯(lián)甲苯胺 分析標準品,用于環(huán)境分析,≥99%(GC)

Potassium iodide氧化鉍 AR鹽酸鄰聯(lián)甲苯胺 AR

Potassium tartrate hemihydrate氧化鉍 SP堿式碳酸鋅 AR,57.5%

Bismuth potassium iodide氧化鉍 99.9%甘氨酸 AR,99.5-100.5%

K-Lyte氧化鉍 99.99% metals basis甘氨酸鈉 98%

Potassium fluoaluminate氧化鉍 99.999% metals basis甘氨酸甲酯鹽酸鹽 99%

Potassium fluoborate硒粉 99.9% metals basis,200目甘氨酸乙酯鹽酸鹽 99%

Potassium titanium fluoride二氧化硒 AR,99%氟鋁酸 98.5%

Tripotassium phosphate trihydrate碲 99.99% metals basis氟硅酸 AR,99.0%

Potassium pyroantimonate4-二甲氨基吡啶 99%氟硅酸 99.999% metals basis

他唑巴坦鈉 (標準品)Rad23B (D4W7F) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/HRP  辣根過(guò)氧化物酶標記的兔抗生物素抗體IgG

D-環(huán)絲氨酸RIP3 (E1Z1D) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/Gold  膠體金標記的兔抗生物素抗體IgG

D-環(huán)絲氨酸(標準品)IFITM2 AntibodyRabbit Anti-Biotin/FITC  FITC標記的兔抗生物素抗體IgG

鹽酸四環(huán)素Afadin (D1Y3Z) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/Cy7  Cy7標記的兔抗生物素抗體IgG

鹽酸四環(huán)素(標準品)TRIB2 (D8P2X) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗生物素抗體IgG

嘌呤霉素Acetyl-Histone H4 (Lys16) (E2B8W) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/Cy5  Cy5標記的兔抗生物素抗體IgG

/羧芐西林鈉n-phospho (Active) β-Catenin (Ser33/37/Thr41) (D13A1) Rabbit mAb (PE Conjugate)Rabbit Anti-Biotin/Cy3  Cy3標記的兔抗生物素抗體IgG

羧芐西林鈉(標準品)DAX1 (D2F1) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/Bio  生物素標記的兔抗生物素抗體IgG

芬苯達唑;苯硫咪唑PVR/CD155 (D3G7H) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/APC  APC標記的兔抗生物素抗體IgG

芬苯達唑;苯硫咪唑(標準品)Phospho-Rpb1 CTD (Ser2/Ser5) (D1G3K) Rabbit mAbRabbit Anti-Biotin/AP  堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗生物素抗體IgG
偽牛痘病毒PCR檢測試劑盒價(jià)格人血紅蛋白H(HbH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:250毫克

人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光250毫克

人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃250毫克

人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT1克

人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:10克

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