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猿分支桿菌PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

猿分支桿菌PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
FDA檢測試劑盒熱滅活的目的是使血清中的補體成分滅活,除非必須,不建議做這樣的處理

更新時(shí)間:2021-03-13
訪(fǎng)問(wèn)次數:624

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱(chēng)

 猿分支桿菌PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)

 英文名稱(chēng)

 Mycobacterium simiaePCR

 貨號

 LZP7015

實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
小鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa試劑盒Anti-KNDC1研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞膜受體 細胞膜蛋白

兔多肽YY(PYY)elisa試劑盒Anti-KCNG4/KV6.3研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 線(xiàn)粒體 泛素

豚鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa試劑盒Anti-KY/Kyphoscoliosis peptidase研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 激酶和磷酸酶 線(xiàn)粒體 泛素

人程序性細胞死亡因子4(PDCD4)elisa試劑盒Anti-KLLN研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡

大鼠成纖維細胞生長(cháng)因子13(FGF-13)elisa試劑盒Anti-KCTD18研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 轉錄調節因子

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含青霉素價(jià)格Anti-KIF11/Eg5/TRIP5研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 新陳代謝

5-尿苷一磷酸價(jià)格Anti-KAT13A/SRC1研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 細胞生物 信號轉導 轉錄調節因子 新陳代謝

α-甘油磷酸二鈉保存Anti-Keratan Sulfate研究領(lǐng)域  心血管 信號轉導 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 新陳代謝

豚鼠腎素(Renin)elisa試劑盒Anti-Lysyl tRNA synthetase研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 新陳代謝

魚(yú)11-酮類(lèi)固醇elisa試劑盒Anti-KDM5B/PLU1/Jarid1B研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 細胞骨架

羊環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa試劑盒Anti-KIST/UHMK1研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 新陳代謝 表觀(guān)遺傳學(xué)

異葒草苷Measles virus of fusion protein  麻疹病毒抗原(麻疹病毒融合蛋白)TXNRD1  硫氧環(huán)蛋白還原酶1抗體

紫云英苷FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor)  促卵泡刺激素受體抗原TXNIP  硫氧還蛋白結合蛋白2抗體

對葉百部堿FSH(Follicle-stimulating hormone precursor)  促卵泡刺激素抗原TXNDC9  胚胎干細胞相關(guān)蛋白TXNDC9抗體

仙茅苷GABRA1(gamma-amibutyric acid (GABA) A receptor, alpha 1)  γ1氨基丁酸A型受體α1抗原TXNDC5  硫氧還蛋白5抗體

R型人參皂苷Rh2GABAB1(GABAb Receptor 1)  g-氨基丁酸B1受體(多肽)TXNDC4/ERP44  內質(zhì)網(wǎng)蛋白44抗體

白花前胡甲素GABABR2/GB2(GABA B Receptor 2)  γ1氨基丁酸A型受體B2抗原TXA2R  血栓素A2受體抗體

白花前胡乙素GAD-67 (glutamate decarboxylase 67)  谷氨酸脫羧酶-67抗原Twist2  TWIST蛋白2抗體抗體

貝母辛GADD153(Growth arrest and DNA damage-inducible 153)  生長(cháng)抑制DNA損傷基因153抗原TWIST protein  TWIST蛋白抗體

地奧司明phospho GAP-43(pSer41)(phospho Growth associated protein 43 )  磷酸化神經(jīng)生長(cháng)相關(guān)蛋白43抗原TWA1/C20orf11  20號染色體開(kāi)放閱讀框11抗體

香蒲新苷GAPDH  3-磷酸甘油醛脫氫酶(人)抗原TUSC5  抑癌基因5抗體
猿分支桿菌PCR檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃500毫克

Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50克

Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25毫克

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃100毫克

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:保存:-20℃100毫克

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