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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
人分泌型磷脂酶A2Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-Phospho DDIT4 (Thr23/25) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 信號轉導 生長(cháng)因子和激素 激酶和磷酸酶 表觀(guān)遺傳學(xué)

人骨保素Elisa Kit圖片Anti-Phospho DDR1 (Y513) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 信號轉導 生長(cháng)因子和激素 激酶和磷酸酶 表觀(guān)遺傳學(xué)

人骨形成蛋白4Elisa Kit品牌Anti-Phospho DGCR8 (Ser377) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 干細胞 轉錄調節因子

人抗環(huán)瓜氨酸肽抗體Elisa Kit品牌Anti-Phospho DOK2 (Y299) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 細胞類(lèi)型標志物

人可溶性血管內皮生長(cháng)因子受體1Elisa KitAnti-Phospho E2F1 (S364) Antibody研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 G蛋白偶聯(lián)受體 G蛋白信號

人血管緊張素Ⅱ受體1抗體Elisa Kit圖片Anti-Phospho DOK2 (Tyr299) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 生長(cháng)因子和激素 激酶和磷酸酶 表觀(guān)遺傳學(xué)

人葉酸受體Elisa Kit多少錢(qián)Anti-Phospho DUSP1 (Ser296/318) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶

人腫瘤壞死因子βElisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-Phospho EEF1A2 (Ser358) Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué)

小鼠白介素10Elisa Kit圖片Anti-Phospho EIF2AK3 (T981) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 染色質(zhì)和核信號 信號轉導 生長(cháng)因子和激素 激酶和磷酸酶 表觀(guān)遺傳學(xué)

小鼠白介素18Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-Phospho ELK1 (Ser383) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 細胞膜受體

小鼠胱抑素CElisa Kit品牌Anti-Phospho EPB41 (Tyr660) Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 細胞周期蛋白 細胞分化

小鼠核轉錄因子－1Elisa Kit品牌Anti-Phospho ECT2 (T790) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 信號轉導 細胞凋亡 生長(cháng)因子和激素 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 細胞膜受體

小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-Phospho ELK3 (Ser357) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶 細胞膜受體

小鼠可溶性CD40配體Elisa Kit品牌Anti-Phospho EPS15 (Y849) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶

小鼠免疫球蛋白EElisa Kit圖片Anti-Phospho EPHB1 (Tyr594/604) Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 免疫學(xué) 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節因子 激酶和磷酸酶

0.5%棉子糖發(fā)酵管anti-Cyr61  冬綠苷

七葉苷發(fā)酵管anti-CYP19  二氫槲皮素

無(wú)菌液體石蠟Anti-Cytochrome C  二氫楊梅素

蛋白胨Anti-Cytokeratin  莪術(shù)

Kovacs 氏靛基質(zhì)試劑Anti-anti-HCMV PP65/HHV5 PP65   二氫丹參酮Ⅰ

硝酸鹽肉湯anti-HCMV UL49   1，8-二羥基蒽醌

無(wú)菌硝酸鹽肉湯anti-HCMV UL23/HHV5 UL23  1,5-O-二咖啡?？?/span>

硝酸鹽還原試劑Anti-DAD1   1,3-O-二咖啡?？?/span>

明膠生化管Anti-DAD2   莪術(shù)烯

營(yíng)養瓊脂NAAnti-DBH   莪術(shù)二酮
丙型肝炎病毒型PCR檢測試劑盒價(jià)格組織牛病毒性腹瀉病毒（Bovine Viral Diarrhoea Virus；BVDV）定量PCR擴增elisa試劑盒    20次    *

組織凝血酶/活化凝血因子II（THROMBIN/FACTOR IIa）活性熒光定量elisa試劑盒    20次    *

組織凝血酶/活化凝血因子II（THROMBIN/FACTOR IIa）活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織檸檬酸合成酶活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織尿酸含量直接（TPTZ）比色法定量檢測試劑盒50次*

組織尿酸含量酶偶聯(lián)比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織尿素比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織尿激酶型纖維蛋白溶酶原激活劑（uPA）活性熒光定量elisa試劑盒    20次    * 

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注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時(shí)間；4．循環(huán)次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應體系與反應條件。

實(shí)驗過(guò)程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
３．所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿(mǎn)意，然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?，從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi)，并且要充分混勻。檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照)，每個(gè)測試反應體系配制如下表：
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
酒石酸泰樂(lè )菌素價(jià)格Anti-NAGP8 Antibody研究領(lǐng)域 心血管 細胞生物 免疫學(xué) 脂蛋白

菠蘿蛋白酶價(jià)格Anti-NAXE Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)

氧化型輔酶Ⅱ單鈉鹽使用說(shuō)明書(shū)Anti-NAGP8 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞膜受體

羧肽酶A（牛胰）使用說(shuō)明書(shū)Anti-NBEAL1 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞外基質(zhì)

蘋(píng)果酸脫氫酶使用說(shuō)明書(shū)Anti-NBPF12 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細胞粘附分子 細胞類(lèi)型標志物

肌酸酶價(jià)格Anti-NBPF5P Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

甘油-3-磷酸氧化酶實(shí)驗步驟Anti-NBR1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué)

β-半乳糖苷酶使用說(shuō)明書(shū)Anti-NBPF5P Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 細胞粘附分子 細胞膜蛋白

四硫磺酸鹽煌綠增菌液基礎實(shí)驗步驟Anti-NBPF7 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子

虎紅實(shí)驗步驟Anti-NCAPG Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞膜蛋白

苯胺藍（溶）使用說(shuō)明書(shū)Anti-NCAPH Antibody研究領(lǐng)域 腫瘤 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞外基質(zhì)

甲基紫6B價(jià)格Anti-NCAPG2 Antibody研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 細胞粘附分子 細胞外基質(zhì)

4-硝基苯磷酸二鈉保存Anti-NCBP1 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)

保存Anti-NCBP2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué) 發(fā)育生物學(xué) 細胞分化

乙二醛縮雙（鄰氨基酚）使用說(shuō)明書(shū)Anti-NCK2 Antibody研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學(xué)

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白4(IGFBP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白3(IGFBP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白2(IGFBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白2(IGFBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子2受體(IGF2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子1受體(IGF1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子1受體(IGF1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法

胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法
草魚(yú)呼腸孤病毒型PCR檢測試劑盒廠(chǎng)家線(xiàn)粒體甘油3磷酸?；D移酶抗體Senside B中文名：番瀉苷B別名：分子式：C42H38O20

囊性組織液體蛋白15抗體Senside A中文名：番瀉苷A別名：分子式：C42H38O20

胰高血糖素抗體Dantron中文名：1,8-二羥基蒽醌別名：1,8-Dihydroxyanthraquine; Chrysazin分子式：C14H8O4

線(xiàn)粒體甘油三磷酸脫氫酶2抗體Aloe-emodin中文名：蘆薈大黃素別名：Aloeemodin; 1,8-Dihydroxy-3-hydroxymethylanthraquine分子式：C15H10O5

甘油三磷酸脫氫酶1抗體其它醌類(lèi)