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禽痘病毒PCR檢測試劑盒規格

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

禽痘病毒PCR檢測試劑盒規格
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
16-α OHE-1檢測試劑盒
用于MR和VP試驗緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培養基、磷酸鹽葡萄糖胨水培養基)

更新時(shí)間:2021-03-14
訪(fǎng)問(wèn)次數:434

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱(chēng)

 禽痘病毒PCR檢測試劑盒規格

 英文名稱(chēng)

 Avian Pox virus(=Fowl Pox Virus、FPV)PCR

 貨號

 LZP6408

實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
人甲狀腺球蛋白(TG)elisa試劑盒Anti-CYP2E1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 激酶和磷酸酶  

人甲狀旁腺激素1-34(PTH 1-34)elisa試劑盒Anti-CYP2E1 Antibody(原貨號PB0186)研究領(lǐng)域  細胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 干細胞 新陳代謝  

人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)elisa試劑盒Anti-CYP2S1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 干細胞 新陳代謝  

人基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)elisa試劑盒Anti-CYP2U1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉導 轉運蛋白 表觀(guān)遺傳學(xué)  

人混合系列蛋白激酶樣結構域(MLKL)elisa試劑盒Anti-CYP3A4 Antibody(原貨號PB1111)研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉導 新陳代謝 表觀(guān)遺傳學(xué)  

人踝蛋白(talin)elisa試劑盒Anti-CYP7A1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 新陳代謝  

人核心結合因子α1,CBFA1/RUNX2 elisa試劑盒Anti-Cytochrome P450 1A2/Cyp1a2 Antibody研究領(lǐng)域  心血管 細胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 新陳代謝  

人核心蛋白聚糖(DCN)elisa試劑盒Anti-DAPK1 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 信號轉導 新陳代謝  

人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)elisa試劑盒Anti-CYP7A1 Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 新陳代謝  

人胱天蛋白酶10(CASP10)elisa試劑盒Anti-Cyt 19/As3mt Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 新陳代謝  

人胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)elisa試劑盒Anti-DAPK2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 細胞類(lèi)型標志物  

人谷胱甘肽(GSH)elisa試劑盒Anti-DAXX Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 信號轉導 新陳代謝  

人高分子量脂聯(lián)素(HMW Adiponectin)elisa試劑盒Anti-DAXX Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號轉導 新陳代謝  

人甘油醛-3 - 磷酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)elisa試劑盒Anti-DAXX Antibody研究領(lǐng)域  腫瘤 細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 信號轉導 新陳代謝 表觀(guān)遺傳學(xué)  

人甘露糖凝集素受體(MBLR)elisa試劑盒Anti-DARS2 Antibody研究領(lǐng)域  細胞生物 發(fā)育生物學(xué) 新陳代謝  

ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar

Medium-sulfurbacteria

RVS 肉湯 RVS Broth 250 食品中沙門(mén)氏菌檢驗選擇性增菌(ISO標準)

胰化大豆堅固綠瓊脂(TSFA)250g/瓶濾膜法細菌總數測定incubationmedia胰化大豆堅固綠瓊脂(TSFA)250g/瓶濾膜法細菌總數測定

StuartTransportMedium

5%乳糖發(fā)酵管  5%乳糖發(fā)酵管  20支  BR

1% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  1% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  20支  BR

3% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  3% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  20支  BR

3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  3.5% NaC1阿拉伯糖發(fā)酵管  20支  BR
禽痘病毒PCR檢測試劑盒規格胞漿環(huán)氧化物水解酶抗體9-Benzylcarbazole-3-carboxaldehyde中文名:9-芐基咔唑-3-甲醛別名:分子式:C20H15

紅細胞生成素抗體4-Benzyloxycarbonyl-2-piperazine中文名:4-芐氧羰基-2-酮別名:分子式:C12H14N2O3

大腸桿菌脂多糖抗體Benzyl carbazate中文名:肼基甲酸芐酯別名:分子式:C8H10N2O2

電子轉移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體5-Benzoylpentaic acid中文名:5-苯甲?;焖釀e名:分子式:C12H14O3

EFHA1蛋白抗體7-Benzyloxyindole中文名:7-芐氧基吲哚別名:分子式:C15H13

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