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ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:IL-17E/IL-25/FITC 熒光標記白介-17E抗體IgG苯磺酰肼 98%IL-17F/IL-24/FITC 熒光標記白介-17F抗體IgGT 三水合物 AR,99.0%IL-18R Alpha/FITC 熒光標記白介-18受體α鏈抗體IgG對苯磺酯 98%IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光
產(chǎn)品分類(lèi)
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產(chǎn)品名稱(chēng) | ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | ANA ELISA Kit |
產(chǎn)品規格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028593 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標本要求:
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(cháng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
生長(cháng)激素結合蛋白(P)試劑盒 吳茱萸內酯亞硝 CP,95%5-吲哚 99%
生長(cháng)激素結合蛋白(P)試劑盒 吳茱萸新四草,二水 PT2-異煙 97%
上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 吳茱萸總偏磷 AR肉桂酰 97%
上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 五-O-乙酰-β-D-吡喃葡萄糖鍺試劑 AR3-肉桂 98%
免疫反應性生長(cháng)激素(irGH)試劑盒五水合硫司巴丁鍺試劑 97%2-芐 99%
免疫反應性生長(cháng)激素(irGH)試劑盒五味子素高 99.99% metals basis2--5- 99%
硫褪黑色素(MS)試劑盒五味子N-苯鄰氨苯(釩試劑) AR,95%2--5-苯 97%
硫褪黑色素(MS)試劑盒五味子乙N-苯鄰氨苯(釩試劑) 98%4-吲哚 98%
長(cháng)效狀腺激素(LATS)試劑盒 五味子酚焦銻 AR,99.0%2-苯 98%
長(cháng)效狀腺激素(LATS)試劑盒 五味子酚乙1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 AR,90.0% 2-硫-5-嘧啶-4- 95%
上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 五味子素1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚 98%2--4-硝吡啶 98%
上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 五味子乙素多乙烯多 AR4-吲哚 98%
免疫反應性生長(cháng)激素(irGH)試劑盒五味子酯檸檬二氫 AR,98.0%2--6-氟苯 98%
免疫反應性生長(cháng)激素(irGH)試劑盒五味子酯戊氟氫化 AR,99.0%2--N,N-二乙酰 97%
抗利尿激素/血管加壓素/精氨加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒五味子酯乙氟氫化 CP,98.0%4--2-三氟喹啉 97%
抗利尿激素/血管加壓素/精氨加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒西貝母N-苯硫脲 98%2--4-吡啶 95%
ANA中性粒細胞抗體ELISA試劑盒本染色液是一種組織或細胞染色時(shí)常用的可以把細胞核染成綠色或藍綠色,把細胞漿和細胞核中的核仁染成紅色的染色液。甲基綠可以和細胞核中的DNA結合,從而產(chǎn)生細胞核染色;而派洛寧可以和細胞漿或核仁中的RNA結合,從而可以使細胞漿和核仁被染色。改進(jìn)了染色液配制方法,不含很多甲基綠-派洛寧染色液中使用的劇毒甲醇。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本甲基綠-派洛寧染色液染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行甲基綠-派洛寧復染。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。
注意事項:
1. 需自備4%多聚、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。
2第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預實(shí)驗。
儲存條件:室溫避光,有效期一年。
操作步驟:
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。