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CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:Inhibin Beta C /FITC 熒光標記抑制βC抗體IgGD-木糖 超純級, ≥99%Inhibin Alpha/Biotin 生物化抑制α抗體IgGβ-煙酰腺二核 95%Insulin/FITC 熒光標記標記胰島抗體IgG叔丁氧羰肼 98%Insulin/FITC 熒光標記胰島抗體IgG肟 99%In
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | CSPP1 ELISA Kit |
產(chǎn)品規格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028597 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(cháng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作步驟:
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。
5羥色(5-HT)試劑盒小豆蔻明硫代硫銨 99%7-吲哚 98%
5羥色(5-HT)試劑盒小蕓木素硫代硫銨 98%4-吲哚 98%
抑制素A(INH-A)試劑盒纈草3-酚 98%N-間苯 97%
抑制素A(INH-A)試劑盒纈草三酯3-酚 分析標準品1-吡唑 98%
性激素結合球蛋白(SHBG)試劑盒性鉻藍K AR(S)-(+)-扁桃酯 98%
性激素結合球蛋白(SHBG)試劑盒辛弗林偶氮熒光桃紅 Biological stain(R)-(-)-扁桃酯 98%
脫氫表雄S7(DHEA-S7)試劑盒辛弗林鹽鹽偶氮熒光桃紅 Dye content 90 %2-烯 ≥99.5%
脫氫表雄S7(DHEA-S7)試劑盒辛辣內酯A鹽氨脲 99%5-酰水楊酯 98%
脫氫表雄(DHEA)試劑盒辛夷脂素鹽氨脲 分析標準品,99.95%2- 98%
脫氫表雄(DHEA)試劑盒新補骨脂異黃1-氨-2-萘酚-4-磺 97%5-硝吲哚 98%
降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒新茜素絡(luò )合指示劑 IndicatorDL-α-氨 98%
降鈣素因相關(guān)肽(CGRP)試劑盒新二氫查爾茜素 97%R-(-)-1,2- 99%
(SS)試劑盒新內酯苯藍,溶 Biological stain(S)-(+)-1,2- 98%
(SS)試劑盒新對葉百部茜素綠 AR2-苯異丁 98%
生長(cháng)激素釋放多肽(GHRP) 試劑盒新苦味素苯藍(溶) BS IND4-吡啶乙鹽鹽 98%
生長(cháng)激素釋放多肽(GHRP) 試劑盒新魯斯可皂元偶氮胭脂紅G Biological stain4-(1-吡咯烷)苯 97%
CSPP1中心體紡錘體極相關(guān)蛋白1ELISA試劑盒本探針是常用的細胞膜熒光探針之一,呈現橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細胞膜后可以側向擴散逐漸使整個(gè)細胞的細胞膜被染色。DiI在進(jìn)入細胞膜之前熒光非常弱,僅當進(jìn)入到細胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光,DiI和磷酯雙層膜結合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長(cháng)為549nm,大發(fā)射波長(cháng)為565nm。
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
CAS:41085-99-8。
DiI可以溶解于無(wú)水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現較難溶解時(shí)可以適當加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。
DiI被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長(cháng)期示蹤劑。DiI通常不會(huì )影響細胞的生存力。被DiI標記的神經(jīng)細胞在體外培養的條件下可以存活長(cháng)達4周,在體內可以長(cháng)達一年。DiI在經(jīng)過(guò)固定的神經(jīng)元細胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day,在活的神經(jīng)元細胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
DiI除了簡(jiǎn)單的細胞膜熒光標記外,還可以用于檢測細胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過(guò)程中細胞遷移,通過(guò)FRAP檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
用于細胞膜熒光標記時(shí),DiI的常用濃度為1-25μM,常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當的固定液會(huì )導致熒光背景較高。
注意事項:熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
儲存條件:4℃避光,有效期一年。