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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨號 |
miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒 | 25次 | LZ-S64296 |
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/(比色測定波長(cháng)為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:血清(漿)可直接測定。紅細胞:需按照試劑盒中說(shuō)明書(shū)上紅細胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
動(dòng)物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。=
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗方法學(xué)》以及試劑盒中詳細說(shuō)明書(shū)。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對照管顯色適當時(shí),即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟,但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線(xiàn)粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人補體因子8b(C8b)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 微枝形桿菌屬Anti-phospho-c-Jun (Ser63) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體
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miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒反玉米素核苷透析袋 即用型 扁寬34 截留分子量50000
反玉米素核苷透析袋 即用型 扁寬38 截留分子量1000
茶多酚透析袋 即用型 扁寬38 截留分子量2000
茶多酚透析袋 即用型 扁寬40 截留分子量5000
茶多酚透析袋 即用型 扁寬45 截留分子量1000
茶多酚透析袋 即用型 扁寬45 截留分子量2000
茶堿透析袋 即用型 扁寬45 截留分子量3500
茶堿透析袋 即用型 扁寬45 截留分子量10000
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感,避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。