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CK-13細胞角蛋白13ELISA試劑盒公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:Testosterone 小鼠睪tong規格: 48T*PCNA 小鼠增殖細胞核抗原規格: 48T*BMP-2 小鼠骨形成蛋白-2規格: 48T*BMP-4 小鼠骨形成蛋白-4規格: 48T*GDNF 小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞系衍化神經(jīng)營(yíng)養因子規格: 48T*
產(chǎn)品分類(lèi)
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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產(chǎn)品名稱(chēng) | CK-13細胞角蛋白13ELISA試劑盒 |
英文名稱(chēng) | CK-13 ELISA Kit |
產(chǎn)品規格 | 48T/96T |
產(chǎn)品貨號 | LZ-E028992 |
需要而未提供的試劑和器材:
1. 產(chǎn)品僅用于科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 干凈的試管和Eppendof管
5. 系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時(shí),用多通道移液器
6. 蒸餾水,容量瓶等。
標本要求:
1.標本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻進(jìn)行,提取后應盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
備試劑與收集血樣:
1. 收集標本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細胞培養上清液、組織勻漿等盡早檢測, 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(cháng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復凍融。
2. 標準品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設標準 管 8 管,管加標本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標準品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復作對倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對照。
3. 10× 標本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
樣本實(shí)驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
(5)培養細胞
檢測細胞內的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
靶向核糖核(TR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-2-羥磺二戊 99%鹽標準溶液 0.2000mol/L(0.2N)
過(guò)氧化還原5(PRDX5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-2-羥磺N,N-二乙 99%鹽標準溶液 0.1000mol/L(0.1N)
白介素1受體Ⅰ(IL1R1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-2-羥磺二異丁 99%鹽溶液 6mol/L(6N)
XII B組磷脂A2(PLA2G12B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-2-羥磺鈉鹽二異丁 99.5%鐵標準溶液 1000μ/ml
白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-2-羥磺鈉鹽二異 Standard for GC ≥99.5% (GC)鐵標準溶液 100μ/ml
白介素2受體β(IL-2Rβ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-(2-乙磺)二異 >99.5%(GC)標準溶液 0.05000mol/L (0.1N)
白介素3介導核因子(NFIL3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-(2-乙磺)二異 CP,98%鉛標準溶液 1000mg/L,溶劑:1%硝
白三烯C4(LTC4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-(2-乙磺)二異 分析標準品,>99.5% (GC)鉛標準溶液 100μg/ml
白三烯D4(LTD4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N-乙磺鈉鹽二異 >99.0%(GC)硝汞標準溶液 0.005000mol/L(0.01N)(劇品)
白三烯E4(LTE4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-(2-羥乙)哌-N-乙磺鈉鹽鄰苯二二異丁酯 99%硝鎳標準溶液 0.01000mol/L(0.01M)
白彈性蛋白(HLE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-(2-羥乙)哌-N-乙磺鈉鹽二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)鎳標準溶液 1000μg/ml
白調節素(LR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-(2-羥乙)哌-N'-4-丁磺二乙 AR,99.0%鎳標準溶液 100μg/ml
白共同抗原(LCA/CD45)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-(2-羥乙)哌-N'-4-丁磺二乙 CP,97.5%化溶液 3.3mol/L(3.3N)
白免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒哌-N,N-雙(2-乙磺)二乙 GC化溶液 3mol/L(3N)
白血病抑制因子受體(LIFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒哌-N,N-雙(2-乙磺)二乙 GR,99.50%重鉻標準溶液 1/24mol/L(0.25N)
甘氨酰tRNA合成(GARS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 哌-N,N-雙(2-乙磺)二乙 ACS重鉻標準溶液 1/60mol/L(0.1N)
CK-13細胞角蛋白13ELISA試劑盒用途:
細胞核染色,可用于免疫組化的復染
注意事項:
染色結果為:細胞核呈綠色。
儲存條件:室溫,避光,6個(gè)月
操作步驟:
1.標準品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑藴势芬恢?,用?hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時(shí)藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長(cháng)依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以?xún)冗M(jìn)行。