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A族鏈球菌(GAS)核酸試劑盒廠(chǎng)家

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

A族鏈球菌(GAS)核酸試劑盒廠(chǎng)家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
麻屬苷(標準品)PhosphoPlus® RIP3 (Ser227) Antibody Duet四正丁基銨 二氟代三基硅酸鹽

葫蘆巴鹽酸鹽(標準品)Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-酸

更新時(shí)間:2021-03-13
訪(fǎng)問(wèn)次數:652

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時(shí)間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應動(dòng)力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產(chǎn)品名稱(chēng)

 A族鏈球菌(GAS)核酸試劑盒廠(chǎng)家

 規格

 48T

 貨號

 LZP8086

實(shí)驗過(guò)程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設立一個(gè)的PCR實(shí)驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿(mǎn)意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jì)Υ?,從而確保實(shí)驗與實(shí)驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽(yáng)性對照),每個(gè)測試反應體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應加入的量 N個(gè)反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個(gè)PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽(yáng)性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
紅景天苷Ribosomal Proin L26 (D8F6) Rabbit mAb酸二芐酯

葒草苷(標準品)EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5-噻吩-2-酸

XAV-939;NVP-XAV 939Rpb1 CTD Antibody Sampler Kit2,二磺酰

胡黃連苷I(標準品)C17orf59 (D2B5X) Rabbit mAb依澤替米貝

胡黃連苷 II(標準品)PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb對基甲酰

胡黃連苷 III(標準品)PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb1,丁磺酸內酯

胡蘿卜苷(標準品)p300 (D2X6N) Rabbit mAb3,4,5-三氟

β-胡蘿卜素(標準品)ZO-1 Antibody甲基酸酯

胡麻屬苷(標準品)PhosphoPlus® RIP3 (Ser227) Antibody Duet四正丁基銨 二氟代三基硅酸鹽

葫蘆巴鹽酸鹽(標準品)Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-酸

葫蘆素B(標準品)Acetyl-Histone H2B (Lys12) Antibody(溴基)酸

槲皮苷(標準品)PFKP Antibody2,7-二溴芴

槲皮素-7-O-葡萄糖苷(標準品)ALDH1A1 (D9Q8E) XP®Rabbit mAb(基)酸

花椒毒酚(標準品)Mouse Basic Fibroblast Growth Factor (mFGF basic/FGF2)硝酸釹六水合物

槐果(標準品)Mouse Basic Fibroblast Growth Factor (mFGF basic/FGF2)氨基-溴吡唑

環(huán)氧澤瀉(標準品)Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control2,4,5-三氟甲

黃柏(標準品)FastScan™ Phospho-p70 S6 Kinase (Thr389) ELISA Kit2-氟-6-嘌呤

黃柏酮(標準品)DDB-2 (D4C4) Rabbit mAb二環(huán)己基化膦

酸化雄激素受體CD68/FITC  熒光素標記CD68IgG100 ul

酸化雄激素受體CD69/CLEC2C/AIM/FITC  熒光素標記活化誘導分子CD69IgG100 ul

酸化蛋白激酶AKT1,2,3CD73/FITC  熒光素標記胞漿-5´-核苷酸酶-ⅡIgG100 ul

酸化蛋白激酶BCD79A/IGBP-1 /FITC  熒光素標記免疫球蛋白結合蛋白-1IgG100 ul

酸化活化復制因子2B7-1/CD80 /FITC  熒光素標記抗刺激分子B7-1蛋白IgG100 ul

凋亡相關(guān)蛋白3CD80/B7-1/FITC  熒光素標記刺激分子B7-1蛋白IgG100 ul

自噬相關(guān)蛋白18CD82/KAI1/FITC  熒光素標記腫瘤轉移抑制蛋白1IgG20 ul

自噬相關(guān)蛋白4ACD83/Cell surface proin HB15/FITC  熒光素標記CD83IgG100 ul

載脂蛋白A4CD84/SLAMF5/FITC  熒光素標記CD84IgG100 ul
A族鏈球菌(GAS)核酸試劑盒廠(chǎng)家活性依賴(lài)的神經(jīng)保護肽抗體2,4,6,6-Tetramethyl-3(6H)-pyridine中文名:別名:分子式:C9H13

α1酸性糖蛋白1/類(lèi)粘蛋白1抗體Crebanine中文名:克班寧別名:8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxyaporphine分子式:C20H214

α1酸性糖蛋白2抗體(類(lèi)粘蛋白2)Glycozolinine中文名:別名:6-Methyl-9H-carbazol-3-ol; Glycozolil分子式:C13H11

核突觸蛋白抗體Siacutine中文名:青風(fēng)藤堿別名:分子式:C19H214

β-肌動(dòng)蛋白/β-Actin 抗體(內參抗體)Pterolactam中文名:別名:5-Methoxy-2-pyrrolidine分子式:C5H92

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