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探討elisa試劑盒的免疫沉淀技術(shù)

更新時(shí)間:2022-07-22點(diǎn)擊次數:505
   elisa試劑盒具有特異性強,準確度高,檢查速度快等多方面的特點(diǎn)。在食品藥品監督管理局,進(jìn)行食品檢查的時(shí)候,可是有效的快速的檢測出結果,看檢測食品是否符合要求。elisa試劑盒的檢測速度比國標法快速,且敏感性高、特異性強,結果分析簡(jiǎn)單。
  elisa試劑盒能便于滲透入組織細胞內,且未發(fā)現嚴重的物理吸附現象。在PPA實(shí)驗中稀釋液常用含0.5%(v/v)Tween20的0.02mol/L Ph 7.4 Tris-HC1緩沖液。用特殊的微孔板作為測定板,elisa試劑盒用親和素包被微孔板,然后用生物維生素標記探針的3端,再通過(guò)該生物維生素和包被在微孔板上的親和素發(fā)生連接,將探針固定在微孔板上,形成一個(gè)固相捕獲系統。
  擴增時(shí)引物用抗原標記,這樣擴增產(chǎn)物中就會(huì )滲入抗原。
  PCR擴增產(chǎn)物與微孔板上的探針雜交,從而捕獲被測靶序列,由于擴增產(chǎn)物中已經(jīng)滲入抗原,在微孔中加入HRP標記抗體后,酶標抗體就與靶序列的抗原免疫結合,后加入酶底物進(jìn)行酶促顯色,elisa試劑盒通過(guò)光密度測定實(shí)現定量。
  PCR-ELISA比PCR本身在病毒分型,基因多態(tài)性分析與克隆鑒定等方面有其*的優(yōu)勢。另外,不應用同位素標記,因而避免了放射性帶來(lái)的危害,而且整個(gè)實(shí)驗周期僅需6h左右,操作簡(jiǎn)便,可用于大量標本的檢測。盡管與熒光素染色凝膠電泳相比較,PCR-ELISA檢測結果的特異性,靈敏性和準確性有顯著(zhù)的提高,但是ELISA試劑盒基本上是一個(gè)開(kāi)放性的反應系統,特別是在洗滌大鼠ELISA試劑盒反應板時(shí),很容易造成污染,從而引起假陽(yáng)性。因此,在PCR-ELISA整個(gè)實(shí)驗過(guò)程中,必須進(jìn)行嚴格的無(wú)菌操作,同時(shí),PCR-ELISA對PCR產(chǎn)物和探針的雜交條件要求嚴格。

TEL:021-61210612

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