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小鼠心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒實(shí)驗要點(diǎn):
1.CTAB 溶液在低于15℃時(shí)會(huì )析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。
2.在最適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過(guò),某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可減輕這兩種現象,同時(shí)可加入適量的異戊醇(苯酚—氯仿—異戊醇=25:24:1),異戊醇的作用是消泡,并使蛋白質(zhì)層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養和收集 將含有質(zhì)粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24 小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12 小時(shí)至對數生長(cháng)后期。小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA 十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿(mǎn)足限制酶切割、電泳分析的需要。
需要自備的器材:
1.人科研4PCR檢測試劑盒研究?jì)x器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
小鼠骨保護素(mouse OPG)
小鼠骨橋素(mouse OPN)
小鼠骨鈣素(mouse Osteocalcin)
小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥(niǎo)苷酸(mouse 8-OHdG)
小鼠食欲素A(mouse Orexin A)
小鼠氧化低密度脂蛋白(mouse OxLDL)
小鼠抑瘤素mouse Oncostatin M(mouse OSM)
小鼠催產(chǎn)素(mouse Oxytocin)
小鼠骨保護素配體(mouse OPGL)
小鼠血小板活化因子(mouse PAF)
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(mouse PAP)
小鼠血小板相關(guān)抗體IgG(mouse PAIgG)
小鼠增殖細胞核抗原(mouse PCNA)
小鼠纖溶酶原激活劑抑制物-1(mouse PAI-1)
小鼠血小板生長(cháng)因子(mouse PDGF)
小鼠血小板源生長(cháng)因子-BB(mouse PDGF-BB)
小鼠血小板生長(cháng)因子受體α(mouse PDGF sRα)
小鼠可溶程序性死亡因子(mouse sPD-1)
小鼠6-酮-前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)
小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)
小鼠磷脂酶A2(mouse sPLA2)
小鼠Pleiotrophin(mouse Pleiotrophin)
小鼠P53蛋白(mouse P53)
小鼠趨化因子(mouse RANTES)