熒光-PCR法定量技術(shù)一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來(lái)實(shí)現其定量功能的。其原理隨著(zhù)PCR反應的進(jìn)行，PCR反應產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強度也等比例增加。每經(jīng)過(guò)一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強度信號，這樣我們就可以通過(guò)熒光強度變化監測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴增曲線(xiàn)圖。
熒光-PCR法的應用十分廣泛，舉例說(shuō)明一下：
1.核酸定量分析
對傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如甲型H1N1流感，轉基因動(dòng)植物基因拷貝數的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。
2.基因表達差異分析
比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時(shí)相的表達差異以及cDNA芯片或差顯結果的確證。
3.SNP檢測
檢測單核苷酸多態(tài)性對于研究個(gè)體對不同疾病的易感性或者個(gè)體對特定藥物的不同反應有著(zhù)重要的意義，因分子信標結構的巧妙性，一旦SNP的序列信息是已知的，采用這種技術(shù)進(jìn)行高通量的SNP檢測將會(huì )變得簡(jiǎn)單而準確。
4.甲基化檢測
甲基化同人類(lèi)的許多疾病有關(guān)，特別是癌癥。一種技術(shù)在擴增之前先處理DNA，使得未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不受影響，用特異性的引物和Taqman探針來(lái)區分甲基化和非甲基化的DNA，這種方法不僅方便而且靈敏度更高。
5.產(chǎn)前診斷
人們對遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無(wú)法治療，到目前為止，還只能只能通過(guò)產(chǎn)前監測，減少病嬰出生，以防止各類(lèi)遺傳性疾病的發(fā)生，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測其Y性別決定區基因是一種無(wú)創(chuàng )傷性的方法，易為孕婦所接受。
6.病原體檢測
采用熒光-PCR檢測技術(shù)可以對淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類(lèi)乳頭瘤病毒、單純皰疹病毒、人類(lèi)免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、結核分枝桿菌、EB病毒和巨細胞病毒等病原體進(jìn)行定量測定。與傳統的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。
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更新時(shí)間：2021-09-18
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