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鴨子刺鼠相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。
試劑使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。
(2)通常購買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話(huà),更加注意其他保管和管理。
(3)萬(wàn)一試劑操作者并非專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。必須在專(zhuān)業(yè)人士的指導監督下進(jìn)行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關(guān)法律法規正當處理。
(4)購買(mǎi)后,請務(wù)必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒(méi)有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
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