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沃爾巴克氏菌通用PCR檢測試劑盒反應步驟:
(1)嚴格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
(2)加樣后及時(shí)放人孵箱。標本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗*。
(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴,防止陽(yáng)性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現象從而導致“花板"的出現。
(4)用洗板機洗板時(shí),保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現象而導致“花板"的出現。
(5)合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應保證酶標板清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實(shí)驗結果。