豬輪狀病毒A組（PRV-A）核酸檢測試劑盒實(shí)驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗前請充分溝通確認實(shí)驗方案和樣本情況；

2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗的背景信息、物種、基因準確的名稱(chēng)和ID號；

3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標準曲線(xiàn)對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設計的引物來(lái)指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

注意事項：

①加入試劑的順序應*，以保證所有反應板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說(shuō)明書(shū)中標明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應揮發(fā)，避免長(cháng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對光敏感，避免長(cháng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗完成后應立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標板時(shí)應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。

⑧試劑應按標簽說(shuō)明書(shū)儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過(guò)后的標準品應丟棄，不可保存。

⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。