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牛巨細胞病毒探針?lè )晒舛縋CR試劑盒實(shí)驗操作:
1. 模板制備(樣本制備區)
建議使用配套水生動(dòng)物病害基因組 DNA/RNA 提取試劑盒系列產(chǎn)品,具體過(guò)程詳見(jiàn)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
2.添加模板(模板添加區,放置于冰盒中進(jìn)行)
請于-20℃條件下保存,有效期 12 個(gè)月
取出所需測試數的已含有反應液 A-TSV-I 的 PCR 管,將試劑*解凍,離心 30 秒,在管蓋上標記管名(陰性對照管 NG、樣品 XX、陽(yáng)性對照管 PG)。打開(kāi)管蓋向各管管底分別加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,蓋上陰性對照管管蓋,其他各管分別沿管壁加入 2μL 模板,順序為待測樣品模板、PG-TSV-I,依次蓋好各管管蓋,離心 30 秒,立即進(jìn)行擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產(chǎn)物分析區)
①恒溫儀器 63℃條件下反應 60 min。待儀器升溫至 63℃后,新建程序,設置實(shí)驗名稱(chēng)及反應時(shí)間,將步驟 2中離心后的 PCR 反應管放入恒溫熒光分子檢測儀,點(diǎn)擊開(kāi)始檢測。
②若使用熒光定量 PCR 儀,則熒光基團選擇 FAM,淬滅基團選擇 None,將 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作為一個(gè)循環(huán),于 63℃ 45 s 處收集熒光信號,60 個(gè)循環(huán)。
試劑使用須知:
(1)請參照相關(guān)法規、文獻、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行安全操作。產(chǎn)品僅用于科研
(2)通常購買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話(huà),更加注意其他保管和管理。
(3)萬(wàn)一試劑操作者并非專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。必須在專(zhuān)業(yè)人士的指導監督下進(jìn)行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關(guān)法律法規正當處理。
(4)購買(mǎi)后,請務(wù)必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒(méi)有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進(jìn)行操作。